Methodologie voor FSL-gebruik (koding)

FSL-constructen zullen, wanneer ze in oplossing (zoutoplossing) en in contact zijn, spontaan worden opgenomen in cel- en virusmembranen. De methodologie omvat eenvoudigweg het bereiden van een oplossing van FSL-construct (en) in het bereik van 1–1000 μg / ml. De werkelijke concentratie hangt af van het construct en de hoeveelheid construct die in het membraan nodig is. Een deel van de FSL-oplossing wordt toegevoegd aan een deel van de cellen (tot 100% suspensie) en ze worden geïncubeerd bij een ingestelde temperatuur binnen het bereik van 4-37 ° C (39-99 ° F), afhankelijk van de temperatuurcompatibiliteit van de cellen wordt gewijzigd. Hoe hoger de temperatuur, hoe sneller de FSL-insertie in het membraan gaat. Voor rode bloedcellen wordt bij een incubatie van 2 uur bij 37 ° C een insertie van> 95% bereikt met een insertie van ten minste 50% binnen 20 minuten. In een bredere context,Een FSL-inbrengtijd van 4 uur bij kamertemperatuur of 20 uur bij 4 ° C geeft resultaten die vergelijkbaar zijn met 1 uur bij 37 ° C voor op koolhydraten gebaseerde FSL's die in rode bloedcellen worden ingebracht. De resulterende kodecytes of kodevirions hoeven niet te worden gewassen, deze optie moet hoe dan ook worden overwogen als een overmaat aan FSL-construct wordt gebruikt in de koding-bewerking.

Afbeelding 090A | 6b. FSL-constructen (analoog aan zonnebloem) ingebracht via hun lipidestaart (wortels) in een liposoom. De afstandhouder van de FSL (steel) houdt de functionele groep van de FSL (bloemhoofd) weg van het oppervlak. | Xiphiaz / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:FSLs_inserted_into_a_liposome.svg) van Wikimedia Commons

Afbeelding 090A | 6b. FSL-constructen (analoog aan zonnebloem) ingebracht via hun lipidestaart (wortels) in een liposoom. De afstandhouder van de FSL (steel) houdt de functionele groep van de FSL (bloemhoofd) weg van het oppervlak. | Xiphiaz / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:FSLs_inserted_into_a_liposome.svg) van Wikimedia Commons

Auteur : Yavor Mendel

Referenties:

Moleculaire biologietechnieken I

Technieken van moleculaire biologie III

Reacties